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組織芯片

更新時間:2024-09-26

簡要描述:

組織芯片免疫組化染色是將多種組織以規則的微陣列方式排列于同一載體上,同時進行相同指標的免疫組化檢測。具有體積小, 標本信息含量大 , 一次性實驗即可獲大量結果。實驗條件更易控制一致,減少批間批內誤差,結果更準確。節省試劑,節省人力物力等優點。

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組織芯片實驗流程:

切片脫蠟至水-抗原修復-3%的雙氧水處理-畫圈-血清封閉-一抗4℃過夜孵育-二抗室溫孵育-顯色-蘇木素染核-脫水、透明、封片-鏡檢

 

注意事項:

1)石蠟切片制片,組織取樣后應立即放入固定液中,避免凍存;

 

2)冰凍切片制片應取用新鮮組織,以免抗原丟失;

 

3)組織蠟塊可以保存很長時間,但是石蠟切片理論上不能超過半年。


組織芯片原理:

1.選取待研究的組織。現在人們利用組織芯片技術對人體各組織均有研究,包括肝臟,前列腺,心臟,乳房等等,據相關數據顯示,在大腦組織中的應用最多。醫學上常選取一些病變器官進行研究。根據制作方法來分,微陣列主要有石蠟包埋的組織微陣列和冰凍微陣列兩種。

2.經檢測后標記出待研究的區域。組織微陣列的檢測儀主要是高性能顯微鏡、熒光顯微鏡或共聚焦熒光顯微鏡。適用的檢測技術有蘇木精—HE染色,免疫組織化學(IHC)染色,原位雜交(ISH),熒光原位雜交(FISH),原位PCR,寡核苷酸啟動的原位DNA合成(PRINS)等。
3.使用組織芯片點樣儀將標記好的組織按設計排列在空白蠟塊模上。首先要利用打孔機在已經標記好的靶位點上進行打孔,將組織芯轉入蠟塊模孔中,重復操作可轉入上千個樣品組織芯。
4.使用切片機對陣列蠟塊進行連續切片即獲得組織芯片。根據制作方法來分,微陣列主要有石蠟包埋的組織微陣列和冰凍微陣列兩種。后者可以克服上述前者的多種缺陷(含醛基的化合物(可能損傷RNA或使目標抗原結構斷裂或破壞抗原——抗體結合位點,另外,石蠟包埋乙醇固定過的組織也無法避免RNA降解)。
組織芯片的出現,與基因芯片配合使用在尋找疾病基因中有很好的互補作用。在腫瘤研究中發揮著重要作用。將基因芯片篩選出的基因作成探針,再將探針與組織芯片中眾多的腫瘤組織進行熒光原位雜交,尋找腫瘤發生發展的相關因素。

 

 
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